Strep-tag是一種在蛋白純化系統(tǒng)中應(yīng)用廣泛的親和標(biāo)簽。它包括兩種類型Strep-tag II和Twin Strep-tag II。Strep-tag II是一個短肽標(biāo)簽，由8個氨基酸（WSHPQFEK）組成，可以作為N端或C端標(biāo)簽與蛋白質(zhì)融合，對重組蛋白的影響很小。進一步改進的Twin Strep-tag II是一個順序排列的兩個Strep-tag II序列（通過內(nèi)部氨基酸連接），該標(biāo)簽?zāi)軌蛳馭trep-tag II一樣進行溫和、快速的純化。這兩個標(biāo)簽可以自由結(jié)合Streptactin和STarm Sterptactin中的任一配體。標(biāo)簽/配體的結(jié)合取決于所需的結(jié)合強度和應(yīng)用。這兩個標(biāo)簽和Streptaction和STarm Sterptaction的親和力在μg/ml范圍內(nèi)，這種高親和性是任何其他現(xiàn)有親和性標(biāo)記系統(tǒng)都無法實現(xiàn)的。此外，這種結(jié)合標(biāo)簽和配體的靈活性允許在生理條件下純化重組蛋白。
Strep-tag標(biāo)記技術(shù)可用于從各種表達系統(tǒng)中純化功能性鏈球菌標(biāo)記蛋白，包括桿狀病毒、哺乳動物細胞、酵母和細菌。該技術(shù)可耐受不同的緩沖條件和添加劑(高鹽、洗滌劑、還原劑、金屬離子和螯合劑)，普遍適用于大部分蛋白質(zhì)性質(zhì)，而且方便于蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)質(zhì)檢相互作用分析。一般來說，上述兩種標(biāo)簽都不干擾目標(biāo)蛋白的折疊或生物活性，不與重金屬離子反應(yīng)，不具有離子交換特性，也不會引起蛋白質(zhì)聚集。因此，純化后無需去除Strep-tag II和Twin Strep -tag II。此外，Twin Strep -tag II/STarm Sterptaction組合適用于固定化和檢測分析應(yīng)用，如ELISA或SPR。這種多功能性使得Strep-tag標(biāo)記技術(shù)優(yōu)于其他可用的基于標(biāo)記的親和純化系統(tǒng)。
STarm Streptactin Beads 4FF的配體蛋白是Streptactin的突變體，其偶聯(lián)至高度交聯(lián)的4%瓊脂糖微球上。樣品中低濃度(50 μmol/L)的D-生物素不會影響目的蛋白和STarm Streptactin Beads 4FF的結(jié)合效果。該產(chǎn)品在使用后可用平衡液再生，或者使用10 mM NaOH進行一定程度的清洗。介質(zhì)具體性能見下表。
? 產(chǎn)品性能
| 項目 | 性能 |
| 基質(zhì) | 高度交聯(lián)的4%瓊脂糖凝膠 |
| 配體 | Streptactin Mutant |
| 載量 | 4 mg twin Strep-tag II蛋白 /ml 介質(zhì) |
| 微球粒徑 | 45-165 μm |
| 流速上限 | 300 cm/h |
| 儲存緩沖液 | 含20%乙醇的1×PBS |
| 儲存溫度 | 2-8℃ |
? 訂購信息
| 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
| STarm Streptactin Beads 4FF | SA092005 | 5 ml |
| SA092025 | 25 ml | |
| SA092100 | 100 ml | |
| SA092500 | 500 ml | |
| SA09201L | 1 L | |
| SA09210L | 10 L |
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